诊断学第七版教材-第63节
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电解质溶液稀释的血细胞悬液通过两侧有稳定电流的小孑L时,由于细胞导电性质较电解质
溶液低,小孑L感应区内电阻增加,瞬间引起电压变化而产生一个脉冲信号,称为通过脉
冲。电压变化的程度取决于细胞体积,即细胞体积越大,产生的脉冲越大,脉冲振幅越
高。脉冲信号经过放大、甄别、整形后,送入计数系统,而得到细胞计数结果,同时还提
供细胞体积分布图形。这些显示细胞群分布情况的图形,称为细胞分布直方图(n()too—
gram)。直方图是由测量每个细胞通过小孑L感应区的脉冲累积得到的,与细胞计数同时进
行分析测量。直方图的横坐标表示细胞体积,纵坐标表示细胞的相对数量。体积数据以飞
升(f1)为单位。
(一)白细胞体积分布直方图
白细胞经过特殊的溶血剂处理后,细胞失水皱缩,各群细胞之间的体积差异增加。仪
器计算机部分可将白细胞体积在35~450f‘l范围内分为若干通道,细胞根据其大小分别分
配在不同的通道中,从而得到白细胞体积分布的直方图(图4—2—4)。
白细胞可以根据体积大小区分为三个群,在直方图上表现为三个峰(区)。
1.第一群是小细胞区(35~90f1)
WBC
RBC
PLT
图4—2—4血细胞体积分布直方图
胞出现,需要进一步作血涂片显微镜检查,
(二)红细胞体积分布直方图
主要为淋巴细胞,包括成熟淋巴细胞、
异型淋巴细胞。
2.第二群是中间细胞区(90~
160f1) 包括单核细胞、原始细胞及幼
稚细胞,以及嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒
细胞。
3.第三群是大细胞区(160~
450f1) 包括中性分叶核粒细胞以及杆
状核和晚幼粒细胞。
根据各群占总体的比例可计算出各
群细胞的百分率,如再与该标本的白细
胞总数相乘,即可得到各类细胞的绝
对值。
白细胞体积分布直方图的图形变化
并无特异性,因图中细胞分群只是根据
细胞体积大小来区分,在1个群体中,
可能以某种细胞为主,如小细胞区主要
是淋巴细胞’,大细胞区以中性粒细胞为
主。由于细胞体积之间有交叉,同一群
中可以包括多种细胞存在,其中任何一
种细胞增多,均可使直方图产生相似的
变化。因此,白细胞直方图只是粗略判
断细胞比例的变化或有无明显的异常细
进行细胞分类计数及形态观察。
红细胞直方图体积分布曲线的显示范围从24~360f1。仪器将大于36fl的颗粒计为红
第j二章=?临昧虹液津槛鹬
细胞,直方图上反映的是生理状态红细胞的大小。在典型的直方图上,可以看到两个细胞
群体:①红细胞主群:从50fl偏上开始,有一个近似两侧对称,基底较为狭窄的正态分布
曲线,又称“主峰”。②小细胞群:位于主峰右侧,约分布在130~185fl区域,又称“足
趾部”。它是一些二聚体、三聚体、多聚体细胞,小孔残留物和白细胞的反映。
测量时,仪器首先将“足趾部”剪去,再对主峰的两侧边缘进行适当的整形,左侧除
去细胞碎片、大血小板或血小板凝块等,右侧除去二聚体、三聚体、多聚体细胞、小孔残
留物和白细胞等的干扰。
与红细胞直方图相关的有2个参数,即MCV和RDw。McV代表红细胞平均体积,
与红细胞峰处在X轴上的位置有关。MCV增大,细胞峰右移,MCV变小细胞峰左移。
RDw变异性大,波峰的基底增宽;反之,基底变窄。直方图有时会呈“双峰”,则说明外
周血中存在2个红细胞群。故在分析直方图图形时,要注意主峰的位置、峰的基底宽度,
以及峰顶的形状及有无双峰现象。红细胞直方图图形变化,再结合其他有关参数综合分
析,对某些贫血的诊断和鉴别诊断具有一定的价值。几种贫血的细胞直方图图形变化
如下:
1.缺铁性贫血典型的缺铁性贫血呈小细胞性贫血,McV降低,主峰曲线的波峰左
移;红细胞大小的非均一性,RDw增高,则波峰基底增宽,显示为小细胞非均一性贫血
特征。
2.轻型p一珠蛋白生成障碍性贫血 呈小细胞均一性贫血,其图形表现为波峰左移,
基底变窄。因此,这一特征可作为与缺铁性贫血鉴别的指标。
3.铁粒幼细胞性贫血 红细胞呈典型的“双形”性改变(dimorphic RBC),即小细
胞低色素性红细胞与正常红细胞同时存在,故出现波峰左移、峰底增宽的双峰。缺铁性贫
血经治疗有效时,也可出现峰底更宽的类似的双峰图形。
4.巨幼细胞贫血 红细胞呈大细胞非均一性,直方图波峰右移,峰底增宽。经治疗
有效时,正常红细胞逐渐增加,与病理性大细胞同时存在,也可出现双峰现象,故有助于
判断疗效。
5.混合性营养性贫血 营养性巨幼细胞贫血可同时合并缺铁性贫血,前者McV增
高,后者降低,故直方图图形需视哪一类细胞占优势。如两者的严重程度相似,则反映
Mcv的波峰位置可显示正常,而RDw明显增高,则峰底增宽。
(三)血小板直方图
直方图体积分布范围为2~20fl。血小板直方图可反映血小板数(plt)、血小板平均容
积(MPV)、血小板分布宽度(PDw)和血小板比容(PCV)等参数。
第二节 溶血性贫血的实验室检测
溶血性贫血(hemolytic anemia)是指各种原因导致红细胞生存时间缩短、破坏增多
或加速,而骨髓造血功能不能相应代偿而发生的一类贫血。红细胞在血管内破坏者为血管
内溶血,在血管外破坏者为血管外溶血。临床上按病因和发病机制可分为两大类,即红细
胞内在缺陷所致的溶血性贫血和红细胞外因素所致的溶血性贫血。前者多为遗传疾病,如
遗传性球形红细胞增多症等,但也有后天获得性疾病如阵发性睡眠性血红蛋白尿。细胞外
因素所致的溶血性贫血均为后天获得性疾病。
一、溶血性贫血的筛查检测
(一)血浆游离血红蛋白测定
【参考值】O.50%、完全溶血》O.38%NaCl溶液时为脆性增高。主
要见于遗传性球形细胞增多症.溻掎体到白身伟癌忡溶向件岔向、溃俜件椭圆形细胞增多
症也可增高。
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2.脆性减低 常见于海洋性贫血,也可见于缺铁性贫血、某些肝硬化及阻塞性黄
疸等。
(二)红细胞孵育渗透脆性试验
【原理】红细胞孵育过程中,葡萄糖的消耗增加,贮备的ATP减少,导致红细胞膜
对阳离子的主动传递受阻,钠离子在红细胞内集聚,细胞膨胀,渗透脆性增加。
【参考值】 未孵育:50%溶血为4.00~4.45g/L NaCl
37℃孵育24h:50%溶血为4.65~5.9g/L NaCl
【临床意义】常用于轻型遗传性球形细胞增多症、遗传性非球形细胞溶血性贫血的诊
断和鉴别诊断。
1.脆性增加 见于遗传性球形细胞增多症、遗传性椭圆形细胞增多症、遗传性非球
形细胞溶血性贫血。
2.脆性减低 见于珠蛋白生成障碍性贫血、缺铁性贫血、镰形细胞贫血、脾切除
术后。
(三)自身溶血试验及纠正试验
【原理】先天性非球形细胞性溶血性贫血病人,由于红细胞内酶缺陷,葡萄糖酵解障
碍,不能提供足量ATP,以维持红细胞内的钠泵作用。病人红细胞无菌条件下在自身血
浆中温育48h,使ATP储备减少,钠泵作用减弱,导致溶血增强。在孵育过程中,分别
加入葡萄糖和ATP作为纠正物,并以氯化钠溶液为对照,观察溶血是否能被纠正。
【参考值】正常人红细胞经孵育48h后,仅轻微溶血、溶血度