诊断学第七版教材-第109节
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生殖道支原体初次分离较慢，一般需10天左右才生长出“荷包蛋”状菌落，故而不适合
于临床快速诊断。DNA探针技术和荧光定量PCR技术目前已用于临床实验室的检测。
2．螺旋体检测 螺旋体是一群细长、柔软、运动活泼、呈螺旋状的微生物。将标本
置于暗视野显微镜下检查运动活泼、具有特殊形态的螺旋体具有诊断意义。除钩端螺旋体
外，其他螺旋体如梅毒螺旋体、伯氏疏螺旋体、回归热螺旋体等尚不能人工培养，因而，
血清学诊断广泛应用于临床实验检测。显微镜凝集试验、间接凝集试验、酶联免疫吸附试
验检测患者血清中的特异性抗体是常用的血清方法。用性病研究实验室玻片试验
（vDRL）或快速血浆反应素环状卡片试验（RPR）对梅毒患者血清进行过筛试验，出现
阳性者再用荧光密螺旋体抗体吸附试验（FTA—ABS）或抗梅毒螺旋体微量血凝试验
（MHA—TP）作确诊试验。PCR检测可快速检测出螺旋体特异核酸片段，目前，已逐步
成为常用的检测方法。
3．立克次体检测 立克次体是一类严格细胞内寄生的原核细胞型微生物，在形态结
构、化学组成及代谢方式等方面均与细菌类似：具有细胞壁；以二分裂方式繁殖；含有
RNA和DNA两种核酸；由于酶系统不完整需在活细胞内寄生；对多种抗生素敏感等。立
克次体病多数是自然疫源性疾病，且人畜共患。取血液或组织进行立氏立克次体血清学试
验，分离培养和鉴定，通过荧光染色从皮肤或其他组织中找到病原体有助于确定诊断。血
清学诊断需取3份血清标本，即发病第1周、第2周、第4～6周。PCR通过检测立克次
体特异性核酸可进行早期诊断。外斐试验为非特异性血清学诊断试验，用于斑疹伤寒、斑
点热和恙虫病的确诊，特异性缸清学试验有免疫荧光试验、酶联免疫吸附试验和补体结合
试验等。
4．衣原体检测 衣原体是不活动的专性细胞内寄生物，有化学上与革兰阴性菌相似
的细胞壁，具有核糖体，可出现胞质内包涵体。直接显微镜检查细胞质内的典型包涵体对
衣原体感染诊断有参考价值。衣原体的分离培养与病毒培养一样，在鸡胚卵黄囊内生长良
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好，还可采用动物接种和细胞培养法。过去采用传统的组织培养分离衣原体的方法，技术
难度大，特异性和敏感性均不理想，且费时费钱。目前应用较多的是荧光标记单克隆抗体的
直接荧光抗体法，可快速确定系何种血清型衣原体感染。DNA探针技术和荧光定量PCR技
术目前已经应用于衣原体疾病的诊断、流行病学调查和无症状衣原体携带者的诊断。
5．严重急性呼吸道综合征（SARS）病毒的检测 SARS俗称“非典型肺炎”。SARS
病毒属于单正链RNA病毒（positive single—strand RNA virus）。首例SARS病例于2002年
¨月报道，是冠状病毒科的一个新变种。随后，sARS病毒迅速波及全球，对全球人类形
成了严重的生命威胁。SARs的诊断主要依据流行病学史和各种实验室检查。目前，
sARS的实验室检测手段主要包括：①免疫学方法一一免疫荧光试验（IAF）和酶联免疫
吸附试验（EI．ISA）可在1～2h内快速检测sARs抗体。②基因检测方法——包括RT—
PcR、巢式RT—PCR（：rlested RT—PCR）和荧光定量PCR，其中，荧光定量PCR具有
灵敏度高、特异性强等特点，可进行病毒早期感染诊断，是SA．RS实验室诊断的重要手段
之一。③细胞培养——是鉴别SARs感染最为准确的一种方法，其培养宿主细胞为非洲绿
猴正常肾脏细胞（VER（）E6），可从电子显微镜下直接观察培养细胞中的病毒颗粒，因此
十分准确，但是，其技术难度高，操作复杂，所需时间长等限制了细胞培养用于大量检测
和快速诊断。
（六）实验结果分析和临床应用
各种实验诊断方法中，临床标本分离和培养的阳性结果最具有诊断价值。经病原体鉴
定，可明确诊断病原体的种，并可作药物敏感试验。然而，分离培养的阴性结果并不能完
全排除感染的可能。常因标本采集运送的不当，培养条件不适合，病原体为难培养菌或已
使用抗生素／抗菌素治疗的患者均会出现假阴性结果，尤其是标本直接涂片镜检见细菌而
培养阴性者需考虑是否为I。型细菌、厌氧菌或苛养菌。
病原体的抗原成分检测有助于早期诊断感染性疾病，阳性结果提示某种感染性病原体
的存在，但对于那些存在正常菌群的标本，需考虑共同抗原引起的交叉反应，必须在设有
严格对照试验和排除试验时，阳性结果才能作出正确判断。
核酸检测已成为现代感染性疾病早期诊断的可靠方法之一。由于PcR技术具有很高
的敏感性，影响因素多，容易出现假阴性或假阳性结果，因此，操作者应严格按照操作规
程和程序，设立阴性和阳性对照，避免结果出现误差。其阳性结果只能说明标本内有某种
病原体的核酸，但是否为现期感染病原体则难以肯定。血清学试验是目前应用最广泛的感
染性疾病检测方法。用已知特异性抗原检测患者体内存在的特异性抗体，以出现IgM抗
体或高效价IgG抗体为阳性判断结果有重要诊断意义，并可作出现期感染的结论。为排除
隐性感染或回忆反应，常需作双份血清抗体的动态检测。IgM检测不仅可作早期诊断，且
可区分为原发性感染或复发性感染，在检测时应注意排除类风湿因子的干扰。
第四节病毒性肝炎检测
病毒性肝炎主要有7型，即甲型（HA）、乙型（HB）、丙型（Hc）、丁型（HD）、戊
型（HE）、庚型（HG）、输血传播病毒肝炎，它们分别由肝炎病毒甲型（HAV）、乙型
（HBV）、丙型（HcV）、丁型（HDV）和戊型（HEV）、庚型（HGV）、输血传播病毒
（TTV）所引起。几年前发现的己型肝炎病毒（HFV）与乙型（HBV）的关系仍有待确
认。近年发现的与人类肝炎有关的GB病毒和SEN病毒的研究尚处于初期探索阶段。肝
炎病毒标志物主要包括各型肝炎病毒相关抗原、抗体及核酸。目前常用的检测方法有：针
对抗原或抗体的酶联免疫法（EIA，EI。ISA）、放射免疫法（RIA）、血细胞凝集法
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（RPHA，PHA）；针对核酸的斑点杂交法、聚合酶链反应法（PcR）等。
一、甲型肝炎病毒标志物检测
HAV属微小RNA病毒科，是一种无囊膜正20面体颗粒，直径27～32nm，内含一
条线状单正股RNA基因组，外由衣壳包封而成核壳体。现用于临床的病毒标志物有甲型
肝炎病毒抗原HAVAg、甲型肝炎病毒抗体（IgM、IgA和Ig（＇）及HAV—RNA。
（一）甲型肝炎病毒抗原测定
【参考值】EuSA法检测血清HAV颗粒为阴性，放射免疫（RIA）法或免疫电镜
（IEM）检测粪便HAV颗粒为阴性。
【临床意义】 HAVAg阳性：见于70．6％～87．5％的甲肝患者。HAVAg于发病前
2周可从粪中排出，其发病第一周粪便的阳性率为42．9％，l～2周为18．3％，2周后消
失，粪便中HAV或HAV抗原颗粒的检测可作为急性感染的证据。
（二）甲型肝炎病毒抗体测定
机体感染HAV后，可产生IgM、IgA和IgG抗体。HAV—IgM是病毒衣壳蛋白抗
体，HAV—IgA是肠道黏膜分泌的局部抗体，HAV—Ig（＇在病愈后可长期存在。
【参考值】 EI。IsA法：抗HAV—IgM和抗HAV—IgA均为阴性。抗HAv—IgG阳
性可见于甲肝感染后的人群。
【临床意义】①抗HAVIgM阳性：据观察，甲肝患者抗HAV IgM的阳性率，在发
病后2周为100％，1个月为76．5％，3个月为23．5％，6个月为5．9％，12个月时可为阴
性。所以，抗HAV IgM阳性说明机体正在感染HAV，它是早期诊断甲肝的特异性指标。
②抗HAV IgA阳性：甲肝早期和急性期，由粪便中测得抗HAV IgA呈阳性反应，是早
期诊断甲肝的指标之一。③抗HAV IgG阳性：出现于恢复期且持久存在，是获得免疫力
的标志，提示既往感染，可作为流行病学调查的指标。
（三）HAV—RNA测定
【参考值】 逆转录聚合酶链反应（RT—PcR）法为阴性。
【临床意义】HAV—RNA阳性：对诊断，特别对早期诊断具有特异性。可检测粪便
排毒情况和污染的水源与食物，有利于及时监测与预防甲型肝炎。可作基因分型研究。
二、乙型肝炎病毒标志物检测
乙型肝炎病毒（HBV）是一种嗜肝脱氧核糖核酸病毒，属于包膜病毒。现用于临床
的病毒标志物有乙型肝炎病毒表面抗原（｝mpatitis B virus surface antigen，HBsAg）、乙
型肝炎病毒表面抗体（hepatitis B virus surface antibodyr，抗一HBs）、乙型肝炎病毒e抗原
（hepatitis B virus e antigerL，HBeAg）、乙型肝炎病毒e抗体（hepatitis B virus e antibod—
y，抗一H_Be）、乙型肝炎病毒核心抗原（hepatitis B virus core antigen，HBcAg）、乙型肝
炎病毒核心抗体（1aepatitis B virus core antibodyr，抗一HBc）、乙型肝炎病毒表面抗原蛋白
前s2和前S2抗体、乙型肝炎病毒DNA。
（一）乙肝六项测定
传统乙型肝炎病毒标志物检测常为五项联合检测，俗称“乙肝二对半检测”，包括
HBsAg、抗一HBs、HBeAg、抗一HBe、抗一HBc。随着方法学发展，HBcAg也被加入检
测范围。乙型肝炎病毒标志物联合检测情况与分析见表4—9—2。
【参考值】各项指标EI。IsA法为阴性（s／co≤2．1；S／c0：样品与对照的光密度比
值）；放射免疫分析（RIA）法为阴性。
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